AB-3000B Cellgraph
Sistema de imágenes de bioluminiscencia para células vivas y tejidos.
Cellgraph es un sistema de imágenes para detectar la emisión de luz de bajo nivel en una sola célula viva mediante el uso de una cámara EM-CCD de alta sensibilidad.
Software
Análisis de datos con software dedicado "Visor de Cellgraph"
Cellgraph Viewer es un software de análisis de imágenes. Es muy simple y fácil de usar, y tiene múltiples funciones, como la medición de la intensidad luminiscente, la realización de películas y montajes, etc. en cualquier región de interés dada. El resultado del análisis de los datos de intensidad de bioluminiscencia se puede exportar como archivos de formato CSV.
Aplicaciones
Ensayo de cicatrización de heridas
El resultado del ensayo de cicatrización de heridas observado con Cellgraph se muestra en esta película. Las células NIH3T3 que expresan luciferasa de manera estable se cultivaron hasta que confluyeron por completo. Las heridas se crearon raspando las células monocapa con una punta de pipeta estéril. Luego, Cellgraph controló el cierre de la herida.
Análisis de apoptosis
Las células se transfectaron con el gen informador de luciferasa fusionado con la secuencia señal de dirección nuclear. Las células se estimularon con STS (1 μM) y se observaron mediante Cellgraph. El sistema Cellgraph nos permite visualizar fenómenos apoptóticos como la fragmentación nuclear y la ruptura de membranas en células apoptóticas mediante estimulación STS.
Activación de neuronas GnRH por estimulación kisspeptina
Los ritmos ultradianos de la transcripción del gen de la hormona liberadora de gonadotropina (GnRH) en neuronas GnRH individuales se monitorearon utilizando cortes hipotalámicos cultivados preparados a partir de ratones transgénicos que expresan un reportero de liciferasa desestabilizado impulsado por el promotor de GnRH. Se demostró que la transcripción del gen GnRH se activaba sincrónicamente después de añadir kisspeptina al medio.
Referencia: Hong Kong. Choe, Proc. nacional Academia ciencia Estados Unidos, 110(14), 5677-5682 (2013) [PubMed]
Visualización de oscilaciones de ATP en la etapa temprana de la condrogénesis
Se considera que la condensación celular en las extremidades embrionarias que se produce en la etapa temprana de la condrogénesis desempeña un papel fundamental en la secreción de moléculas de adhesión y matrices extracelulares. La película muestra la visualización de la oscilación de ATP después de la inducción de condrogénesis en células ATCD5 transfectadas con un gen de luciferasa de Phyxothrix hirtus dependiente de ATP. Como se demuestra en este estudio, el sistema Cellgraph es una herramienta eficaz para examinar los mecanismos metabólicos intracelulares.
Referencia: H. Kwon, Cell Death Disease, 3. e278 (2012) [PubMed]
Imágenes de bioluminiscencia de una rebanada de tejido cerebral que contiene el núcleo superquiasmático (SCN) del hipotálamo de ratón
Usando el sistema Cellgraph, se analizó una rebanada de tejido cerebral de un ratón transgénico que expresa luciferasa bajo el control del promotor del gen del reloj. Se extrajo el cerebro y se seccionó en rebanadas de 100 µm de espesor usando un Microslicer, cada una de las cuales se colocó luego en un inserto de cultivo. Las imágenes de lapso de tiempo de una sección SCN adquiridas durante un período de cinco días utilizando el sistema Cellgraph. Usando la función de medición de cuadrícula de "Cellgraph Viewer", la intensidad de bioluminiscencia encada área fue analizada y cuantificada.
Imágenes de lapso de tiempo del tráfico intracelular de importina α
Visualización del desplazamiento nucleocitoplasmático de importina α mediante el sistema Cellgraph. En este estudio, el gen de la importina α fusionado con luciferasa se expresó en células NIH3T3. Las imágenes de lapso de tiempo se adquirieron utilizando un tiempo de exposición de tres minutos a intervalos de cuatro minutos con una lente objetivo de 40x sin binning. La señal de luminiscencia se detectó inicialmente en el citosol, luego en el núcleo. Después de eso, la señal de luminiscencia en el núcleo aumentó gradualmente. Como se muestra arriba, el sistema Cellgraph es una herramienta ideal para observar eventos biológicos como el tráfico de proteínas que ocurren durante un período de tiempo prolongado.
Referencia: Y. Nakajima, PLoS One, 5(4), e10011 (2010) [Pub Med]
Propósito y aplicación
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Ensayo de gen reportero en tiempo real
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Actividad del factor transcripcional, gen Clock (cronofarmacología). Expresión génica (transfección, ARNi, etc.)
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Análisis de respuestas celulares
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Respuesta a medicamentos (medicamento contra el cáncer, DDS, etc.), respuesta al estrés (hormona, inflamación, antioxidante), citotoxicología
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Análisis de la vía de la señal.
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Cascada de señal (Calcio), Apoptosis, etc.
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Adquiera imágenes de cultivo de células o muestras de tejido en un plato de 35 mm en estado vivo.
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Proporcione una atmósfera equivalente a la de una incubadora de CO₂ controlando la temperatura, la concentración de gas CO₂ y la humidificación.
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Detección altamente sensible y precisa de bioluminiscencia tenue con una cámara EM-CCD.
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Aísla y captura bioluminiscencia tenue multicolor.
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Operación fácil a través de una interfaz fácil de usar.
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Control total desde una PC con software dedicado.
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Diseño completamente a prueba de luz y compacto.
